Molekuláris Diagnosztikai: real-time PCR

Jelenleg, a molekuláris diagnosztika mechanizmus, amelynek célja a polimeráz láncreakció (PCR), amely a lendület fejlődésének számos diagnosztikai módszerek betegségek, a meghatározás alapján a genetikai anyag. A végző valós idejű PCR alkalmazásával génfragmens (különösen a nukleinsav) a kórokozót, amely nem található meg más egyének.

A PCR elve a szorzás egy bizonyos kórokozó DNS-fragmenst millió alkalommal a DNS polimeráz egy különleges egység, a továbbiakban a thermal cycler, amely ciklikus ismétlés a hőmérsékleti viszonyok egy adott programot.

Diagnostics PCR lehetővé teszi, hogy ismételje meg egy sor amplifikációk, fenntartása az enzim aktivitását. Ha az erősítés zajlik zökkenőmentesen, egy ciklusban a példányszámot egy adott DNS-darab a kórokozó páros, miután harminc ciklus - száztíz. Ezért PCR használják kiderítheti elég kicsi kórokozók azonosítása ami lehetetlen nélküle.

Meg kell jegyezni, hogy az RNS nem lehet egy sablont PCR valós időben. Ezért, annak érdekében, hogy észlelni virális RNS, mielőtt az amplifikációs kap DNS korrelált megfelelő fragmensét azt. A polimeráz láncreakció lehetővé teszi, hogy készítsen a DNS és RNS mérési kórokozó. Az így kapott információt megfigyelésére használt terápia hatékonyságát használt, és az értékelés a klinikai prognózist.

Ezen túlmenően, real-time PCR nem igényel további intézkedések tekintetében a dekódolás a cél DNS vagy fragmentum szolgál, ami akadályozza a helyes diagnózis és vezethet hamis eredményeket. Ez a megközelítés lehetővé teszi, hogy nem használja az elektroforézis lépés, ami kockázati-redukciós termékek a polimeráz-láncreakció. Továbbá, mivel a csökkenés a manipulációk száma a szer csökkenti a felmérés időpontjában, úgy leegyszerűsíti a folyamatot, csökkenti a hibák valószínűségét. PCR is lehetővé teszi, hogy meghatározza a kezdeti példányszám DNS a kórokozó egy olyan klinikai vizsgálatban, hogy segítsen azonosítani időszakok súlyosbodásának és kellő időben intézkedéseket gyógyítani a beteget.

Ma már számos amplifikációs módszerek rögzítés valós időben. A leggyakrabban használt különböző technikákat alkalmazzuk a amplikon korrelált fluorogén próbákat, a sugárzás intenzitása, amely függ a felhalmozódása a amplikon és rögzített valós időben segítségével egy speciális eszköz úgynevezett thermocycler egy optikai modul. Ez biztosítja a magas szintű érzékenység az elemzés. Ugyanakkor PCR-terméket lehet kimutatni, valamint a nagy mennyiségű melléktermék, amikor elektroforézissel ez bizonyos esetekben nem vette észre.

PCR segítségével pozitív és negatív ellenőrző mintáit, valós időben. Így a pozitív és negatív mintákat egy tanulmány elemezte különálló mintákat, a kontroll minta, ahol bevezetjük minden ilyen mintában, és átadja az összes elemzési lépést.

Ma már nagyszámú eszközt elvégzéséhez a polimeráz láncreakció. Ezek közé tartozik a Bio-Rad, Applied Biosystems, Cepheid és a Roche. Mindegyikük vannak előnyei és hátrányai

Meg kell jegyezni, hogy a PCR - módszert használt diagnosztikai nagyszabású tudományos, kutatási és diagnosztikai központok szerte a világon, mert ez ad lehetőséget, hogy végezzen azonnali eredmények értelmezését.